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大腸桿菌O157: H7是*的出血性腸炎的病原菌,在美國、加拿大、英國、日本以及比利時造成數(shù)起爆發(fā)感染(1, 2)。除牛奶、蘋果汁,沙拉及菠菜可引起感染外,最常見的感染源是生牛肉。
腸痙攣和血性腹瀉是O157: H7感染后的典型癥狀。約10%的病人發(fā)展成急性腎衰竭(溶血性尿毒綜合征)。易感人群多為5歲以下小孩及老人(3)。
VIDAS®ECPT試劑基于重組噬菌體尾絲蛋白方法,特異性檢測含H7型在內(nèi)的大腸桿菌O157。最新研究表明非H7血清型的大腸桿菌O157菌株攜帶毒力基因具有致病性(4, 5, 6)。
原理 VIDAS UP大腸桿菌O157(包括H7)檢測試劑盒是在VIDAS®儀器上應用ELFA技術(shù),自動檢測大腸桿菌O157的酶聯(lián)免疫分析方法。(參見用戶手冊)。
固相容器(SPR®)是類似于加樣頭的一次性使用裝置,在檢測中起固相及加樣器之用。SPR®內(nèi)部用重組噬菌體尾絲蛋白包被,可捕獲含H7型在內(nèi)的大腸桿菌O157。實驗所需試劑均為成品試劑,封閉在試劑條里。
所有檢測步驟均自動由VIDAS®儀器完成。反應培養(yǎng)基在SPR®內(nèi)、外反復循環(huán)。
部分增菌肉湯被分配至試劑條,包被在SPR®內(nèi)壁的重組噬菌體尾絲蛋白捕獲樣本中含H7型在內(nèi)的大腸桿菌O157,未結(jié)合的其他成分通過洗滌步驟清除。標記有堿性磷酸酶的抗體也在SPR®內(nèi)、外循環(huán)并與SPR®內(nèi)壁上噬菌體尾絲蛋白所捕獲的含H7型在內(nèi)的大腸桿菌O157結(jié)合。
最后洗去未結(jié)合的抗體標記物。
最后,SPR®中所用底物為4-甲基傘型磷酸酯,在SPR®內(nèi)、外反復循環(huán)。結(jié)合在SPR®壁上的酶催化水解底物轉(zhuǎn)變成具有熒光的產(chǎn)物:4-甲基傘形酮。在450nm處檢測該熒光強度。 實驗完成時,儀器自動分析結(jié)果,得到每份樣品的測試值。通過內(nèi)部標準比對(閾值)生成分析報告(陰性或陽性)。
梅里埃30122VIDAS 大腸桿菌O157檢測試劑盒
梅里埃30122VIDAS 大腸桿菌O157檢測試劑盒